کشت بافت خرما
کشت بافت خرما
کشت بافت خرما روشی است که با استفاده از تکثیر سلول های غیرجنسی گیاه، نهال مثمر نخل خرما در مقیاس انبوه تولید می شود. مجول کشت بافت
برای درک بهتر اهمیت تولید درخت خرما به روش کشت بافت، بهتر است ابتدا مطلب تولید نهال نخل خرما را به دقت بخوانید تا کلیه روش های تولید این درخت بسیار با ارزش گرمسیری را نیز مرور کرده باشید. دو روش اصلی برای تولید نهال خرما به روش کشت بافت و ریزازدیادی وجود دارد:
Organogenesis پروش اندام زایی
Direc Somatic Embryogenesis روش جنین زایی مستقیم
.
.مجول کشت بافت
تولید نهال خرما به روش کشت بافت
مراحل مختلف آزمایشگاهی کشت بافت خرما به ترتیب به شرح ذیل است:
مرحله اول: آماده سازی (تهیه) ریزنمونه Preparation
ریزنمونه یا ماده ژنتیکی در واقع همان سلول های غیرجنسی اولیه هستند که از پاجوش های درختان مادری گرفته می شوند. پاجوش ها در فصل سرد سال که درخت حداقل فعالیت فیزیولوژیکی را دارد از درخت مادری جدا می شوند. پاجوش هایی با سن دو سال به بالا که حدود ۲۰ تا ۲۵ کیلوگرم وزن و ۱.۵ متر ارتفاع داشته باشند، بهترین گزینه برای جدا سازی هستند.
پس از انتقال پاجوش به آزمایشگاه اندام های اضافی باقی مانده مانند شاخه ها را جدا کرده و کف پاجوش را با دقت برش زده، جدا کنید و دور بیاندازید. اکنون باید از پاجوش چیزی حدود حداکثر ۵۰ سانتی متر باقی مانده باشد. سپس شاخه حاصل را تا زمانی که به یک بافت نرم سفید رنگ برسید برش دهید. دقت کنید شاخه حتما باید پایه لیگنینی شده است را حفظ کند. در نهایت باید به ریزنمونه ای برسید که ۶ تا ۸ سانتی متر طول و ۳ تا ۴ سانتی متر عرض داشته باشد.
.
مرحله دوم: ضدعفونی کردن ریزنمونه Disinfection
اکسپلنت Explant یا همان ریزنمونه با پایه لیگنینی را در محلول آنتی اکسیدان حاوی ۱۵۰ میلی گرم در لیتر اسید سیتریک و ۱۰۰ میلی گرم در لیتر اسید اسکوربیک قرار دهید. یکی از وظایف مهم این محلول نگهداری ریزنمونه تا زمان کشت و محافظت از آن در برابر قهوای شدن (فنل زدگی) است.
در مرحله بعدی، نوک ریزنمونه را به مدت ۲۰ دقیقه با محلول قارچ کش مانند مانکوزب استریل کرده و سه بار با آب مقطر اتوکلاو شده شستشو دهید. سپس ریزنمونه را در محلول هیپوکلریت سدیم ۹% NaOCl همراه با چند قطره تویین ۲۰ به مدت ۵ دقیقه در خلا و همچنین به مدت ۲۰ دقیقه در فشار معمولی فرو ببرید.
.
مرحله سوم: شروع کشت Initiation
محیط کشت اولیه شامل محیط MS معمولی حاوی مقدار کمی یون آمونیوم همراه با تنظیم کننده های رشدی (هورمون های گیاهی) ۰.۳ تا ۰.۱ میلی گرم در لیتر می باشد. حتما دقت داشته باشید Ph محیط کشت قبل از افزودن آگار و اتوکلاو کردن روی ۵.۷ تنظیم شده باشد. پس از آماده سازی محیط کشت، ریزنمونه را در جریان ملایم هود لامینار از محلول درآورده و بدون هیچ شستشویی مستقیما داخل محیط کشت قرار دهید.
پس از کاشت، مرحله تلقیح آغاز می شود که باید ریزنمونه ها بین ۳ تا ۴ هفته در اتاق رشد تاریک قرار بگیرند. سپس با توجه به میزان موفقیت آمیز بودن تلقیح، ریزنمونه ها در فتوپریود (دوره ی نوری) ۱۶ ساعته قرار می گیرند.
.
مرحله چهارم: تکثیر Multiplication
محیط کشت این مرحله مشابه مرحله Initiation است اما تفاوت اصلی در هورمون ها و غلظت های به کار رفته در آن ها است. در این مرحله از هورمون های , BA NAA,NOA, IAAو Kinetin با محدوده غلظت ۰.۵ تا ۵ میلی گرم در لیتر استفاده می کنیم. مهمترین کار در این مرحله جداسازی گیاهچه های توسعه یافته از جوانه های دیگر است زیرا گیاهچه های رشد یافته از رشد سایر گیاهچه های بالقوه جلوگیری می کنند.
.
مرحله پنجم: ریشه زایی و ساقه زایی Rooting and Elongation
پس از گذشت مدت زمان کافی که بسته به نوع واریته خرما می تواند از چند هفته تا چند ماه طول بکشد، گیاهچه هایی که توسعه بهتری داشتند به محیط ریشه زایی منتقل می شود. محیط ریشه زایی پیشنهادی برای خرما شامل: (نوع محیط کشت به همراه غلظت هورمون های پیشنهادی)
محیط کشت MS
NAA به میزان ۱ میلی گرم در لیتر
BAP به میزان ۰.۵ میلی گرم در لیتر
Kinetin به میزان ۰.۵ میلی گرم در لیتر
GA3 به میزان ۰.۵ میلی گرم در لیتر
در تحقیقات انجام شده هورمون NAA کارایی و عملکرد بهتری نسبت به هورمون های IBA و IAA در ریشه زایی خرما نشان داده است. ریزنمونه ها برای حدود ۱۰ تا ۱۵ روز باید در این محیط قرار بگیرند. پس از گذشت این مدت با توجه به نوع واریته خرما و میزان توسعه یافتگی در محیط کشت قبلی به محیط کشت مشابهی با غلظت های متفاوتی از تنظیم کننده های رشدی گیاه منتقل می شوند.
.
مرحله ششم: سازگاری Acclimatization
برای اینکه متوجه و مطمئن شویم آیا زمان مناسب برای انتقال گیاهچه ها به مرحله سازگاری فرا رسیده است یا خیر باید به نکات زیر توجه کنیم:
- گیاهچه ها باید دو تا سه برگ بزرگ و سالم بدون پیچ خوردگی داشته باشند.
- ساقه باید ارتفاعی حدود ۱ تا ۱۰ سانتی متر از پایه تا برگ ها داشته باشد.
- پایه ساقه باید فرمی تاجی-گلابی داشته باشد.
- سیستم ریشه ای باید حداقل ۵ سانتی متر طول داشته باشد.
اگر گیاچه ای دارای همه ویژگی های ذکر شده باشد، آماده سازگاری است. اولین قدم برای شروع مرحله سازگاری شستشوی ریشه ها با آب مقطر است تا آگار و محیط کشت پسبیده به ریشه کاملا حذف شود، سپس برای جلوگیری از حملات قارچی با استفاده از محلول قارچ کش بنلات ۰.۵ درصد، گیاهچه ها ضدعفونی می شوند. در انتها باید گیاهچه ها را در محیط ریشه زایی مناسب مثل پیت ماس و کوکوپیت و در رطوبت مناسب داخل گلخانه قرار دهید.
مجول کشت بافت و برحی کشت بافت هم اکنون بیشترین حجم تولید را در بین واریته های مختلف خرما در بین تولید کنندگان سراسر جهان به خود اختصاص داده اند.
ویدیو خرما تکثیر شده به روش کشت بافت در شرایط درون شیشه ای داخل محیط کشت
منابع:
- Zaid, A., El-Korchi, B., & Visser, H. J. (2011). Commercial Date Palm Tissue Culture Procedures and Facility Establishment. Date Palm Biotechnology, 137–۱۸۰. doi:10.1007/978-94-007-1318-5_8
- https://www.britannica.com/plant/date-palm
- https://en.wikipedia.org/wiki/Date_palm
مطالب مرتبط

کشت بافت بلوط
کشت بافت بلوط کشت بافت بلوط یا تولید درخت بلوط به روش کشت بافت و ریزازدیادی، مهمترین و مقرون به صرفه ترین روش تولید این گیاه بسیار مهم و استراتژیک است. استارت آپ Agrinet مفتخر است اعلام کند که برای...

کاربرد مارکر ISSR
کاربرد مارکر ISSR پتانسیل ادغام ISSR-PCR در برنامههای اصلاح نباتات فراوان است ، در ادامه حوزههای اصلی کاربرد ISSR-PCR در گیاهان مختلف مورد اشاره قرار خواهند گرفت. کاربرد مارکر ISSR در انگشت نگاری ژنومی انگشت نگاریDNA، ابزاری مهم برای خصوصیت...

تولید بذر مصنوعی
تولید بذر مصنوعی تولید بذر مصنوعی یک از فناوری و کاربردهای مهم کشت بافت گیاهی است. تحقیقات علمی ثابت کردهاند که اکنون میتوان بذرهای مصنوعی را با استفاده از مواد گیاهی مختلف تولید کرد. در بیشتر موارد، این دانه های...

تنظیم کننده های رشد گیاه
تنظیم کننده های رشد گیاه تنظیم کننده های رشد گیاه یا هورمون های گیاهی، به ترکیباتی گفته می شود که در تنظیم و کنترل فرآیندهی فیزیولوژیک و رشدی گیاه نقش دارند. این ترکیبات در بخش هایی از گیاه تولید شده...

ساخت محیط کشت MS
ساخت محیط کشت MS ساخت محیط کشت MS یکی از مهمترین و پرکاربردترین فعالیت ها در آزمایشگاه کشت بافت گیاهی است. محیط کشت موراشیگ و اسکوگ که به نام محیط کشت MS نیز شناخته می شود، بستری است برای رشد...

کشت بافت زامیفولیا
کشت بافت زامیفولیا کشت بافت زامیفولیا گیاه زامیفولیا با نام علمی Zamioculcos zamiifolia چندساله، بومی آفریقای شرقی از خانواده Araceae میباشد که در مناطق جنگلی حارهای و مرطوب با زمینهای سخت رشد می کند. به دلیل دارا بودن ویژگی های...

کشت پروتوپلاست
کشت پروتوپلاست سلول های گیاهی علاوه بر غشای پلاسمایی دارای یک دیواره سلولزی نیز هستند که سلول را از ورود عوامل خارجی و بیماری زا حفظ کرده ، شکل داده و از آسیب های فیزیکی در امان می دارد. در...

کشت بافت گیاهی
کشت بافت گیاهی کشت بافت گیاهی ، شاخه ای از دانش زیست فناوری (بیوتکنولوژی) است که به تکثیر درون شیشه ای گیاهان در مقیاس تجاری و انبوه می پردازد، بیش از پنجاه سال از عمر این دانش در دنیا می...

تنوع سوماکلونال
تنوع سوماکلونال اختلاف و تنوع صفات مورفولوژیکی و فیزیولوژیکی حاصل از یک ریزنمونه یا سلول منفرد در شرایط درون شیشه ای، تنوع سوماکلونال نامیده می شود که به علت ناپایداری ژنتیکی رخ می دهد. این اصطلاح برای اولین در سال...

کشت بافت گل محمدی
کشت بافت گل محمدی کشت بافت گل محمدی یک روش تکثیر سریع در مقیاس انبوه برای این گیاه با ارزش است. مقاوت نسبی به گرما خشکی و کم ابی و همچنین امکان کشت در زمین های شیب دار، این گل...

سلامت و برتری ذرت تراریخته
سلامت و برتری ذرت تراریخته سلامت و برتری ذرت تراریخته متاآنالیز گسترده شش هزار مقاله نشان داد: سلامت و برتری ذرت تراریخته دانشمندان با متاآنالیز شش هزار مقاله منتشر شده در ۲۱سال اخیر تایید کردند ذرت های مهندسی ژنتیک شده...

کشت بافت گیاهان دارویی
کشت بافت گیاهان دارویی کشت بافت گیاهان دارویی برای حفظ و مطالعه منابع گیاهان دارویی، تولید و استخراج متابولیت های ثانویه یا همان مواد موثره از گیاهان دارویی استفاده می شود. ریزازدیادی روشی به مراتب کارآمدتر نسب به روش های...

Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Nam bibendum ultrices arcu ac vestibulum. Nam nec tempus quam.
[fusion_separator style_type=”none” sep_color=”” border_size=”0″ icon=”” icon_circle=”” icon_circle_color=”” alignment=”center” hide_on_mobile=”small-visibility,medium-visibility,large-visibility” class=”” id=”” top_margin=”10px” bottom_margin=”10px” /]
[fusion_button link=”http://agrinet.ir/our-culture/” text_transform=”” title=”” target=”_self” link_attributes=”” alignment=”left” modal=”” color=”default” button_gradient_top_color=”” button_gradient_bottom_color=”” button_gradient_top_color_hover=”” button_gradient_bottom_color_hover=”” accent_color=”” accent_hover_color=”” type=”” bevel_color=”” border_width=”” size=”” stretch=”default” shape=”” icon=”” icon_position=”left” icon_divider=”no” animation_type=”” animation_direction=”left” animation_speed=”0.3″ animation_offset=”” hide_on_mobile=”small-visibility,medium-visibility,large-visibility” class=”” id=””]Our Culture[/fusion_button]
من ۲۰ تا مجول کشت بافتی می خواهم